醫院醫療汙水中的菌群怎麽檢驗:
一、采樣方法
用采水器或其他滅菌容器采取汙水樣1000毫升,放入滅菌瓶內,如果是經加氯處理的汙水,需加1.5%硫代硫酸鈉5毫升中和餘氯。
二、檢驗方法
總大腸菌群係指一群需氧及兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽孢杆菌在37℃恒溫箱內,培養24小時,能使乳糖發酵產酸產氣。總大腸菌群數係指每升汙水中,所含的總大腸菌群的數目。
(一)初發酵試驗:以無菌操作將各盛有3倍濃縮乳糖蛋白腖培養液5毫升的5支發酵管內,各接種汙水樣10毫升,將各盛有單料乳糖蛋白腖培養液約10毫升5支的發酵管內,各接種汙水樣1毫升,再將各盛有單料乳糖蛋白髒培養液約10毫升的5支發酵管內,各接種1∶10稀釋的汙水樣1毫升(相當於原汙水樣0.1毫升)。將此15支管已接種的發酵管置於37℃恒溫箱內,培養24小時。
(二)平板分離:經培養24小時後,將產酸產氣及隻產酸不產氣的發酵管,分別接種於伊紅美蘭培養基或品紅亞硫酸鈉培養基上,置37℃恒溫箱培養18~24小時,挑選符合下列特征的菌落,取菌落的一小部分,進行塗片、革蘭氏染色、鏡檢。
1.伊紅美蘭培養基上的菌落色澤:
(1)深紫黑色,具有金屬光澤的菌落;
(2)紫黑色,不帶或略帶金屬光澤的菌落;
(3)淡紫紅色、中心色較深的菌落。
2.品紅亞硫酸鈉培養基上的菌落色澤:
(1)紫紅色,具有金屬光澤的菌落;
(2)深紅色,不帶或略帶金屬光澤的菌落;
(3)淡紅色,中心色較深的菌落。
(三)複發酵試驗:塗片、鏡檢的菌落,如為革蘭氏陰性無芽孢杆菌,則挑取上述典型菌落1~3個接種於一支單料乳糖發酵管內,然後置於37℃恒溫箱內,培養24小時,產酸產氣者(包括小量產氣)即證實有大腸菌群存在。